ABSTRACT The objective with this study was to evaluate the libido and sexual behavior of Pantaneiro stallions in Brazil in two periods, the rainy and dry seasons. Their sexual behavior was evaluated during mating with mares in estrus, and the libido was scored for statistical analysis. The reaction time and time to mount and ejaculate were 78.1±64.6 s and 289.0 s, respectively. The most relevant events of sexual behavior observed in the Pantaneiro stallions were mounting without erection, mounting without ejaculation, smelling, and vocalizing. In general, the season did not affect the libido of stallions. Even with the high temperatures and humidity, which could cause thermal stress, the stallions showed good libido score during most of evaluations, with some individual differences. Pantaneiro stallions are able to breed mares during the entire year and could facilitate the breeding management to raise the number of Pantaneiro horses of the herds and optimize the use of the stallions during the breeding season, with more females per male.

RESUMO O objetivo com este trabalho foi verificar o efeito da adição do óleo de salmão no congelamento do sêmen equino. O experimento constituiu de dois tratamentos. O tratamento 1 (T1) (diluente controle), utilizou-se o BotuCrio® sem a adição de óleo de salmão e o tratamento 2 (T2) (diluente experimental) BotuCrio® adicionado de 2% de óleo de salmão. Foram utilizados três ejaculados de quatro garanhões, totalizando doze coletas (n=12). Avaliou-se a motilidade total e motilidade progressiva pelo programa Ceros 10.8 da Hamilton Thorn Research (HTR), além da funcionalidade de membrana plasmática através do teste hiposmótico. Ambos os tratamentos não apresentaram diferenças estatísticas em relação a motilidade total (T1 25,2±1,7 a, T2 29,7±1,9 a) e motilidade progressiva (T1 11,0±1,1 a, T2 14,1±1,3 a). Com relação ao teste hiposmótico, o tratamento 2 acrescido de 2 % de óleo de Salmão, apresentou melhor proteção da funcionalidade de membrana espermática em relação ao tratamento controle (T2 77,3±1,0 a, T1 68,0±1,0 b). Pode-se concluir que o óleo de salmão, apesar de não alterar a motilidade total e progressiva, confere uma melhor eficiencia da funcionalidade de membrana espermática pós descongelamento em sêmen de equinos.

SUMARY The aim of the present study was to verify the effect of salmon oil addition on cryopreservation of equine semen. The experiment consisted of two treatments. Treatment 1 (T1) (control diluent), BotuCrio® was used without addition of salmon oil and treatment 2 (T2) (experimental diluent) BotuCrio® plus (with) 2% salmon oil. Three ejaculates of four stallions were used, totalizing 12 collections (n=12). Overall motility and progressive motility were evaluated by the Hamilton Thorn Research (HTR) Ceros 10.8 program, as well as the plasma membrane functionality through the hyposmotic test. Both treatments did not present statistical differences in relation to motility (T1 25,2±1,7 a, T2 29,7±1,9 a) and progressive motility (T1 11,0±1,1 a, T2 14,1±1,3 a). With respect to the hyposmotic test, the treatment 2 plus 2% of Salmon oil, presented better protection of sperm membrane functionality in relation to the control treatment (T2 77,3±1,0 a, T1 68,0±1,0 b). It can be concluded that salmon oil, although not altering the total and progressive motility, confers a better efficiency of sperm membrane functionality after thawing in equine semen.

Objetivou-se neste trabalho verificar o efeito da adição de alanina, glicina e glutamina ao meio crioprotetor seminal de garanhões Mangalarga Marchador. Foram utilizados cinco garanhões provenientes do haras Lugavi. Três ejaculados de cada garanhão, após coleta e avaliação, foram divididos em seis tratamentos: sem adição de aminoácidos, adição de 40 mM de alanina, adição de 40 mM de glicina, adição de 60 mM de glutamina, adição de 7 mM de alanina + 7 mM de glicina + 20 mM de glutamina e adição de 40 mM de alanina + 40 mM de glicina + 60 mM de glutamina ao diluente de congelamento convencional. Foram avaliados os parâmetros motilidade total, motilidade progressiva, retidão, linearidade, velocidade média do percurso, velocidade linear, velocidade curvilínea, amplitude lateral de cabeça e frequência de batimentos dos espermatozoides por meio de análise espermática assistida por computador (CASA), funcionalidade da membrana plasmática por choque hiposmótico e integridade de membrana acrossomal pelo teste FITC-PSA. Não houve melhora nos parâmetros de motilidade e cinética espermática nem na funcionalidade de membrana, entretanto, a adição de aminoácidos ao meio crioprotetor seminal aumentou o número de espermatozoides com membrana acrossomal íntegra. Os melhores resultados neste teste são obtidos com 40 mM de alanina (78,6 ± 13,6), 40 mM de glicina (74,7 ± 19,6) ou 7 mM de alanina + 7 mM de glicina + 20 mM de glutamina (76,8 ± 17,5), porém outros estudos devem ser realizados para determinação da concentração ideal desses componentes.

The objective of this study was to analyze the effect of the addition of alanine, glycine and glutamine on frozen seminal extender of Mangalarga marchador breed stallions. Five stallions were used from the Lugavi stables. Three ejaculates from each stallion were divided into six treatments: without the addition of amino acids, addition of 40 mM alanine, addition of 40 mM glycine, addition of 60 mM glutamine, addition of 7 mM glycine, alanine 7 mM + 20 mM glutamine and addition of 40 mM of glycine + 40 mM of alanine + 60 mM of glutamine to conventional frozen extender. The parameters evaluated were total motility, progressive motility, straightness, linearity, path velocity, progressive velocity, track speed, lateral amplitude and beat frequency by computer assisted sperm analysis (CASA), functionality of plasmatic membrane by hypo-osmotic shock and acrossomal membrane integrity by the FITC-PSA test. No improvement was found in the kinematic parameters and sperm motility and nor in membrane functionality but the addition of amino acids to seminal extender resulted in a higher integrity of the acrossomal membrane. The best results obtained in this test are with 40 mM alanine (78.6 ± 13.6), 40 mM glycine (74.7 ± 19.6) or 7 mM glycine, alanine 7 mM + 20 mM glutamine (76.8 ± 17.5), however, more studies should be conducted to reach the ideal concentration of these components.

Objetivou-se verificar o efeito da adição de insulina (0,1; 1 ou 10 UI/mL) ao diluente de congelamento convencional por meio de análise computadorizada das características de motilidade espermática (CASA), funcionalidade da membrana plasmática, por meio de choque hiposmótico, e integridade de membrana acrossomal, avaliada pelo teste FITC/PSA. Não houve efeito significativo da adição de 0,1 e 1 UI/mL de insulina na análise imediata após o descongelamento sobre os parâmetros de motilidade e cinemática espermática, porém o nível de 10 UI/mL de insulina promoveu redução desses parâmetros.

Success rates in equine sperm cryopreservation are lower than in other domestic species. The objective of this study was to verify the effect of adding 0.1 IU/mL, 1 IU/mL and 10 IU/mL insulin to conventional frozen extender using computerized analysis of sperm motility (CASA), plasma membrane functionality by hypo-osmotic shock and acrossomal membrane integrity through the FITC/PSA assay. No difference was observed in treatment with 0.1 and 1 IU/mL after thawing in the analysis of motility and kinematic sperm parameters. However, when 10 IU/mL insulin was used there was a reduction in these parameters.

Objetivou-se avaliar os efeitos da adição de concentrados de proteínas do plasma seminal (PPS) no diluente de congelamento sobre a congelabilidade do sêmen eqüino. Foram avaliados três tratamentos: um controle, no qual o sêmen foi congelado no diluente Botu-Crio®; e outros dois, com adição de 10% ou 20% (v/v) de proteínas do plasma seminal ao diluente. As maiores médias de motilidades total e progressiva foram observadas no tratamento controle, que foram superiores às obtidas com adição de 20% de proteínas, mas não diferiram das obtidas com adição de 10% de PPS. Os resultados do teste hiposmótico e do número de espermatozóides vivos obtidos com o congelamento do sêmen no diluente (controle) foram superiores aos encontrados com a adição de 10% de PPS, que, por sua vez, foram melhores que os observados com a adição de 20% de PPS ao diluente. A adição do concentrado de proteínas do plasma seminal não melhora os parâmetros espermáticos do sêmen eqüino.

The aim of this study was to evaluate the effect of increasing the concentration of protein of the seminal plasma in the extender used for frozing equine semen. Three treatments were compared: The conventional one, defined by using only the Botu-Crio® extender for frozing semen; and other two defined by adding 10% (v/v) or 20% (v/v) of seminal plasma proteins to Botu-Crio® extender. Averages of total and progressive motility were statistically higher in the conventional treatment than in that defined by adding 20% (v/v) of seminal plasma proteins but they did not differ from those obtained by adding 10% (v/v) of seminal plasma proteins to Botu-Crio® extender. The best results for the hypoosmotic test and the number of live spermatozoa were obtained in the conventional treatment, and results for adding 10% (v/v) of seminal plasma proteins were better than those obtained by adding 20% (v/v) of seminal plasma proteins to Botu-Crio® extender. These results indicate that the addition of concentrated protein of the seminal plasma to the extender did not improve the cryopreservation of equine semen.

Durante as estações de monta de 2001/2002 e 2002/2003, 43 éguas da raça Mangalarga Marchador receptoras de embriões foram tratadas aleatoriamente, via intramuscular, com 200 mg/dia de progesterona oleosa (P4) e 41 éguas da mesma raça receberam 0,044 mg/kg/dia de Altrenogest, aleatoriamente, via oral. Ambos os tratamentos foram efetuados entre D0 (dia da ovulação) e D5. As receptoras foram avaliadas no D2 e, se consideradas aptas, foram inovuladas. Dois grupos de 85 éguas da mesma raça foram utilizados aleatoriamente como controle e não receberam progestágeno, mas foram avaliados e inovulados em D2 ou D5, se considerados aptos. Os grupos D2 com P4 e D5 sem progestágeno tiveram maior número de éguas consideradas excelentes ou boas (aptas) no momento da avaliação, 55 (64,71%) e 25 (65,12%), respectivamente. O grupo D2 com Altrenogest apresentou número estatisticamente igual de receptoras aptas a inovulação e descartadas (20 e 21 éguas, respectivamente) no momento da avaliação. Nesta avaliação, no grupo D2 sem progestágeno, a quantidade de receptoras descartadas foi significativamente maior. A taxa de prenhez foi maior nos grupos D2 com P4 e D5 sem progestágeno (72,72 e 76,36%, respectivamente). No grupo D2 com Altrenogest, obteve-se taxa de prenhez de 52,38%, não-significativa, e, no grupo D2 sem progestágeno, a quantidade de éguas não-gestantes foi maior, embora não-significativa. O tratamento com P4 do D0 ao D5 possibilita antecipar a inovulação de receptoras para D2, com resultados semelhantes ao D5.

During the reproductive season of 2001 and 2002, 43 recipient mares of the Mangalarga Marchador breed were treated randomly with intra-muscular application of 200mg/day of oily progesterone (P4). Another group of 41 mares of the same breed were treated randomly, via oral, with 0.044 mg/kg/day of Altrenogest. Both treatments were performed between D0 (ovulation day) and D5. The recipients were evaluated on D2 and those in adequate conditions were in ovulated. Two groups of 85 mares of the same breed were used as control by not receive any progestogen. They were also evaluated and, when considered appropriate, in ovulated on D2 or D5. The groups D2/P4 and D5 without progestogen presented a significantly greater percentage of recipients considered appropriate during the evaluation, respectively 55 (64.71%) and 25 (65.12%). In the group D2 with Altrenogest, 20 mares were considered appropriate for in ovulation and 21 were not. The group D2 without progestogen showed a significantly higher percentage of mares considered not appropriate. The pregnancy rate after in ovulation for the groups D2/P4 and D5 without progestogen were respectively 72.72 and 76.36%, significantly higher than those from the other treatments. The pregnancy rate for the group D2 with Altrenogest (52.38%) was not significant. Despite a larger number of non pregnant recipients for the group D2 without progestogen, it was not significant. The treatment of mares with P4 from D0 to D5 indicates it is possible to anticipate the in ovulation of recipient mares to D2 and to obtain similar results to when in ovulated on D5.

Objetivou-se com esta pesquisa estudar as características morfométricas e funcionais dos túbulos seminíferos de javalis adultos. Utilizaram-se testículos de cinco animais submetidos a orquiectomia unilateral. O parênquima testicular foi composto por 82,1 ± 2,2% de túbulos seminíferos e 17,9 ± 2,2% de tecido intertubular. O diâmetro tubular foi de 249,2 ± 33,0µm e o comprimento dos túbulos seminíferos por grama de testículo foi de 19,3 ± 4,9m. O coeficiente de eficiência das mitoses espermatogônias, o rendimento meiótico e o rendimento geral da espermatogênese foram, respectivamente, 10,34, 2,71 e 30,50. Cada célula de Sértoli suportou cerca de 13 células germinativas. Conclui-se que os parâmetros histométricos estudados nesta pesquisa foram muito semelhantes aos valores relatados para suínos domésticos, entretanto, o rendimento intrínseco da espermatogênese e os índices de células de Sértoli de javalis foram relativamente baixos quando comparados com aqueles animais.

The aim of this data was to analyze morphology and function of the seminiferous tubule in adult wild boars. Testes removed by unilateral castration of five animals were used. The testicular parenchyma was composed by 82.1±2.2% of seminiferous tubule and 17.9±2.2% of intertubular tissue. The tubular diameter was 249.2±33.0 µm and the seminiferous tubule lenght per gram of testis was 19.3±4.9m. The spermatogonial mitoses efficiency coefficient, meiotic index and spermatogenesis efficiency were 10.34, 2.71 and 30.5 respectively. Each Sertoli cell supported about 13 germinatives cells. The hystometric parameters studied were very similar to those related for domestic boars, however, the wild boars intrinsic efficiency of spermatogenesis and Sertoli cells indexes were smaller than in domestic boars.

Neste trabalho, foi purificada uma proteína macho específica com peso molecular de 19 Kda, a partir de espermatozóides de bovinos, por intermédio de cromatografia de gel filtração. O anticorpo monoclonal (Mab) desenvolvido (C11F) contra esta proteína discriminou duas populações de espermatozóides, como revelado por imunofluorescência em microscopia e citometria de fluxo. O epitopo reconhecido pelo Mab C11F esteve presente em 49,7% da população de espermatozóides. Quando adicionado ao sêmen bovino fresco, o Mab C11F reduziu a motilidade e promoveu a aglutinação dos espermatozóides.

In this work, a 19KDa, male specific protein, from bovine spermatozoa, was purified using gel filtration chromatography. A monoclonal antibody (Mab) developed (C11F) against this protein discriminated two populations of spermatozoa, as revealed by immunofluorescence in microscopy and flow citometry. The epitope recognized by Mab C11F was present in 49.7% of spermatozoa population. When added to fresh bovine semen, the Mab C11F reduced the motility and promoted agglutination of the spermatozoa.